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當前位置:首頁技術文章L00686C eBlot L1快速濕轉儀操作指南

L00686C eBlot L1快速濕轉儀操作指南

更新時間:2025-06-13點擊次數:642
  L00686C eBlot L1快速濕轉儀是一款專為Western Blot實驗設計的高效設備,它通過優化電泳和轉膜過程,顯著縮短了實驗時間并提高了結果的一致性和可重復性。本文將詳細介紹該設備的操作步驟,幫助用戶輕松上手并充分發揮其性能。
 
  一、準備工作
 
  在開始使用L00686C eBlot L1快速濕轉儀之前,確保所有必要的耗材和試劑準備就緒。這些包括:
 
  1.電泳膠:根據實驗需求選擇合適的聚丙烯酰胺凝膠。
 
  2.轉膜膜:通常選用PVDF或硝酸纖維素膜(NC膜)。
 
  3.緩沖液:轉移緩沖液(如Towbin緩沖液)、電泳緩沖液(如Tris-Glycine緩沖液)。
 
  4.樣品:已制備好的蛋白質樣品。
 
  5.電極板和墊片:用于夾持凝膠和膜的電極板及墊片。
 
  此外,檢查儀器電源是否正常連接,并確認冷卻系統工作良好,以防止過熱影響轉膜效果。
 
  二、實驗步驟
 
  1.電泳分離
 
  將制備好的樣品加載到電泳膠孔中。
 
  使用適當的電壓和電流進行電泳分離,直至目標蛋白條帶清晰可見。
 
  電泳完成后,小心取出凝膠,避免損壞。
 
  2.組裝轉膜裝置
 
  準備好轉膜膜,先用甲醇活化PVDF膜,然后浸入轉移緩沖液中平衡。
 
  在轉膜槽中依次放置海綿墊、濾紙、凝膠、膜和另一層濾紙,確保各層之間無氣泡且緊密貼合。
 
  將上述組件放入電極板間,注意正負極方向正確。
 
  3.設置轉膜參數
 
  打開L00686C eBlot L1快速濕轉儀的電源,進入控制界面。
 
  根據膜類型、凝膠厚度以及目標蛋白分子量,設定相應的轉膜電壓和時間。一般推薦初始條件為25V持續7分鐘,但具體參數需根據實際情況調整。
 
  啟動設備,開始轉膜過程。期間可通過顯示屏監控運行狀態,確保一切正常。
 
  4.完成轉膜與后續處理
 
  轉膜結束后,關閉電源,取出膜。
 
  立即對膜進行封閉處理,通常使用5%脫脂牛奶或BSA溶液,在室溫下孵育1小時或過夜。
 
  按照標準Western Blot流程進行抗體孵育和顯色反應。

 


 
  三、維護保養
 
  為了保證L00686C eBlot L1快速濕轉儀長期穩定運行,定期維護至關重要:
 
  1.清潔電極板:每次使用后,用蒸餾水沖洗電極板,去除殘留的緩沖液,必要時可用酒精擦拭。
 
  2.檢查冷卻系統:確保冷卻循環水路暢通無阻,定期更換冷卻液。
 
  3.校準儀器:按照廠家說明書要求,定期對儀器進行校準,確保電壓和電流輸出準確。
 
  通過遵循上述操作指南,用戶可以充分利用L00686C eBlot L1快速濕轉儀的優勢,實現高效、可靠的Western Blot實驗。無論是科研工作者還是實驗室技術人員,都能從中受益,提高工作效率并獲得高質量的研究成果。
 
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